（1）获得目的基因的方法有①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③人工合成（逆转录法和化学合成法）．从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具是限制性内切酶，此工具主要是从原核生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧梭苷酸之间的磷酸二酯键断开．

（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T-DNA，它能把目的基因整合到受体细胞染色体DNA．

（3）E过程是根据植物细胞的全能性，利用植物组织培养技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做抗虫接种实验．

（4）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法．

故答案为：

（1）限制酶 原核 磷酸二酯

（2）T-DNA 染色体DNA

（3）植物组织培养 抗虫接种

（4）基因枪

我国科学工作者培育的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于 ( )

转基因的4个步骤，

1，获取目的基因

抗虫棉的毒蛋白基因是来自与

“苏云金牙胞杆菌”的Bt毒蛋白

所以首先要将该基因提取出来

提取的方法简述就简单讲噢

人工合成，或从自然界获取

2，基因表达载体的构建

用同一种限制性核酸内切酶处理Bt毒蛋白的基因和质粒（也可以是其他运载体，选修三，自己看吧有3~4种）

载体上除了要有“目的基因”，还要有“标记基因”“启动子”“终止子”

3，导入受体细胞（当然就是棉花啦）

导入方法，农杆菌转化法（棉花是双子叶植物，用这个最方便）

导入分动物，细菌，单子叶植物，裸子植物和双子叶植物

4，目的基因的表达与检测

将那个植物细胞进行组织培养（选修三细胞工程有，或选修1菊花组织培养那一课也有）

等植物长到一定年龄

（因为是抗虫棉，直接把棉铃虫放上去，过几天看看虫死没就可以了）

种植转基因抗虫棉花要注意哪些事项

答案A

答案解析试题分析：我国科学工作者培育的转基因抗虫棉的抗虫基因来源于苏云金芽孢杆菌中的毒蛋白基因，该基因的表达产物毒蛋白能够抗虫，故选A。

考点：转基因抗虫棉

点评：本题考查了转基因抗虫棉目的基因的来源，属于对识记层次的考查。

抗虫棉 制备技术流程

     棉花是现在我国纺织产品的原材料之一，研究抗虫棉也变成我国必要的研究项目。

     抗虫棉是指棉株体内具有抗杀害虫以减轻危害损失的棉花类型。目前生产上应用的抗虫棉主要是转基因抗虫棉。转基因抗虫棉是将外源抗虫基因(如BT基因)导入棉花体内，从而使棉花本身获得抗虫性。根据导入不同外源基因的种类和数量，转基因抗虫棉可分为转单价基因(如转BT基因)抗虫棉、转双价基因(如转BT基因和转CpTI基因)和转多价基因抗虫棉。目前在生产上应用的主要是转BT基因抗虫棉，有四大系列：一是美国岱字棉系列(如保铃棉32B,33B ，99B等);二是中棉所系列(如中棉所38,中棉所39 ，中棉所41等);三是中国农科院自主开发或合作开发的“国抗”系列(如国抗2号，12号等);四是育种单位用转基因抗虫棉亲本配制的杂交抗虫棉组合。

    种植转基因抗虫棉，一要注意对其他病虫害的防治，二要注意防止后期早衰。转基因抗虫棉只对棉铃虫，红铃虫产生抗性，而对棉蚜，棉蓟马、棉叶、盲鳍象、斜纹夜蛾等不具抗性，甚至有加重发生危害的趋势，因此要特别注意对这些害虫的防治。而且有研究表明，转基因抗虫棉在棉花生长后期抗性降低，长江流域棉区要特别注意对四代棉铃虫的防治。

     目前生产上应用的转基因抗虫棉都是杂交一代种，具有结铃集中，结铃率高等特点，而且转基因毒蛋白在棉株各器官中均有表达，抗虫棉根系分泌物中的毒蛋白对根系微生物有抑制作用，棉花中后期根系活力迅速衰退，导致转基因抗虫棉在生产上容易出现早衰。

这是基因工程。

一·获取目的基因。转基因抗虫棉用的是Bt毒蛋白基因，经PCR技术扩充。

二·构建基因表达载体。包括目的基因，启动子，终止子，复制原点，标记基因，都整合到运载体上。

三·将目的基因导入受体细胞。用农杆菌转化法将表达载体导入棉花细胞。

四·目的基因的检测与鉴定。看是否成功导入和表达。

以上是简单步骤，主要依据高中生物选修三，中间还有很多复杂步骤和注意事项。

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